Schema: kairėje PRP mėgintuvėlis su plazma, separaciniu geliu ir ląstelėmis po sukimosi rodykle, dešinėje du mėgintuvėliai, kiekvienas su sukimosi rodykle, sujungti punktyrine perpylimo rodykle

Vienas ciklas ar du: mėgintuvėlio su geliu ir dvigubo centrifugavimo palyginimas

PRP · Ruošimo būdų palyginimas

Mėgintuvėlyje su geliu pakanka vieno ciklo: separacinis gelis, kurio tankis yra tarp plazmos ir ląstelių tankio, centrifugoje įsiterpia tarp abiejų frakcijų ir laiko jas atskirtas. Atviram dvigubam centrifugavimui be gelio reikia dviejų ciklų: lėto, kuris atskiria eritrocitus, ir, perpylus plazmą, greitesnio, kuris surenka trombocitus dugne. Antrasis ciklas sumažina tūrį ir taip padidina koncentracijos koeficientą, tačiau užima laiko ir prideda atvirų darbo etapų. Kokia sudėtis susidaro, labai priklauso nuo to, kurį sluoksnį paimate ir kokiame plazmos kiekyje.

Skaitymo trukmė apie 8 minutes · Atnaujinta: 2026 m. spalis

Kodėl kraujas atsiskiria sluoksniais

PRP gaunama diferencinio centrifugavimo būdu. Pagreitis parenkamas taip, kad tam tikri ląstelių komponentai nusėstų pagal savo tankį.[1] Po lėto ciklo susidaro trys sluoksniai: viršuje plazma su daug trombocitų, viduryje plonas vadinamasis buffy coat sluoksnis, kuriame gausu leukocitų, apačioje eritrocitai.[1]

Abu būdai remiasi šiuo sluoksniavimusi. Mėgintuvėlyje su geliu darbas tuo baigtas, o taikant dvigubą centrifugavimą dabar prasideda koncentravimas. Literatūroje aprašomi ir vieno ciklo būdai be gelio.[1] Tada barjero nėra.

Su geliu: vienas ciklasGelis skiria plazmą ir ląstelesKraujaspo cikloPRP virš gelioAtviras: du ciklaiKraujas1 ciklaslėtas2 ciklasgreitasPRPPPP pašalintaatviras darbo etapasTrombocitaiPlazmaSep. gelisLąstelėsPPP
Vienas ciklas ar duMėgintuvėlyje su geliu po vieno ciklo PRP yra virš separacinio gelio. Taikant atvirą būdą, po 1 ciklo plazma perpilama, 2 ciklas nusodina trombocitus, tada pašalinama mažai trombocitų turinti plazma (PPP). Taškai žymi atvirus darbo etapus. Schema, tūriai supaprastinti.

Vienas ciklas: ką atlieka separacinis gelis

Separaciniai geliai žinomi iš laboratorinės diagnostikos serumo ir plazmos mėgintuvėlių. Gelis yra tiksotropinis, t. y. veikiamas apkrovos tampa takus. Centrifugoje jis įsiterpia tarp nusėdusių ląstelių ir virš jų esančios skystosios fazės.[2] Tam jo tankis turėtų būti nuo 1,03 iki 1,09 g/cm³. Serumo ir plazmos tankis yra nuo 1,026 iki 1,031 g/cm³.[2] Po ciklo jis kaip matomas barjeras skiria plazmą nuo ląstelių.

Vi PRP-PRO mėgintuvėlyje jau yra 0,8 ml natrio citrato ir gelis. Eiga pagal gamintoją: vakuumu paimti apie 9 ml kraujo, 7 kartus apversti, centrifuguoti 7 minutes esant 1 200 × g, paimti plazmos frakciją virš barjero. Taip gaunama apie 4-4,5 ml PRP iš vieno mėgintuvėlio, priklausomai nuo pradinio kraujo ir eigos. Perpylimas šioje eigoje nenumatytas. Prieigą ir paėmimą reglamentuoja naudojimo instrukcija, praktinių patarimų rasite straipsnyje PRP įtraukimas iš mėgintuvėlio: adata, švirkštas, technika.

Ko vienas ciklas neatlieka: jis atskiria plazmą nuo ląstelių, bet toliau jos tūrio nemažina. PRP yra plazma virš gelio.

Du ciklai: pirma atskirti, tada koncentruoti

Dvigubam centrifugavimui gelio nereikia. Pagal apžvalginį straipsnį apie PRP ruošimą, iš esmės jis vyksta taip:[1]

  1. Centrifuguoti lėtai

    Pirmasis, švelnus ciklas atskiria eritrocitus nuo likusio kraujo.

  2. Perpilti plazmą

    Plazma perpilama į antrą sterilų mėgintuvėlį be antikoagulianto. Grynam PRP imama tik pati viršutinė buffy coat dalis, leukocitų gausiam PRP visas buffy coat sluoksnis. Tai pirmasis atviras etapas.

  3. Centrifuguoti greitai

    Antrasis, intensyvus ciklas nusodina trombocitus dugne. Tada apatinis trečdalis laikomas PRP, viršutiniai du trečdaliai mažai trombocitų turinčia plazma, trumpai PPP.

  4. Pašalinti PPP, resuspenduoti nuosėdas

    PPP pašalinama, o nuosėdos švelniai pasukiojant resuspenduojamos nedideliame plazmos kiekyje, apžvalginiame straipsnyje 2-4 ml. Tada seka paėmimas. Dar du atviri etapai.

Laboratoriniame tyrime 3,5 ml kraujo, centrifuguojant 10 minučių esant 100 × g pirmajame ir 10 minučių esant 400 × g antrajame cikle, davė 70-80 % išeigą ir maždaug 5 kartus didesnę koncentraciją. Su 8,5 ml kraujo išeiga sumažėjo.[3] Komercinių sistemų literatūros apžvalgoje nustatytos jėgos nuo 350 iki 2 008 × g ir bendra ciklų trukmė nuo 5 iki 21 minutės; 6 iš 10 sistemų naudojo du ciklus.[4]

Svarbus ir nuosėdų resuspendavimas. Eritrocitai, perpylimo metu patekę kartu su plazma, po antrojo ciklo gali sudaryti nuosėdas, prie kurių prilimpa trombocitai. Trumpas pasukiojimas jų dažnai visiškai neatpalaiduoja. Apžvalginiame straipsnyje cituotame laboratoriniame tyrime jose liko apie 20 % trombocitų.[1]

Atviriems etapams reikia aiškių taisyklių. Perpylimas, PPP pašalinimas ir paėmimas atliekami su atidarytais mėgintuvėliais. Apžvalginio straipsnio autoriai PRP ruošimui apskritai laiko būtinais griežtą sterilumą ir reguliarią trombocitų rodiklių kontrolę.[1] Vietą, medžiagas ir eiliškumą užfiksuokite darbo instrukcijoje.

Ką rodo rodikliai

Klasifikacijos PRP apibūdina keliais laboratoriniais rodikliais. DEPA klasifikacijoje naudojami keturi: dozė, t. y. koncentracija, padauginta iš tūrio; efektyvumas, t. y. kraujo trombocitų dalis, patenkanti į PRP; grynumas, t. y. trombocitų dalis tarp visų ląstelių; ir aktyvacija.[5] Iš dozės ir efektyvumo išplaukia paprastas ryšys:

Koncentracijos koeficientas = išeiga × kraujo tūris ÷ PRP tūris

Išeiga = efektyvumas pagal DEPA · Koncentracijos koeficientas = trombocitų koncentracija PRP ÷ kraujyje

Skaičiavimo pavyzdys su apvaliais skaičiais, ne gaminio duomenys: po pirmojo ciklo 80 % trombocitų iš 10 ml kraujo yra 5 ml plazmos. Tai 1,6 karto didesnė koncentracija nei kraujyje. Jei antrasis ciklas į 1 ml surenka 70 %, koncentracija yra 7 kartus didesnė. Trombocitų skaičius abiem atvejais panašus. Skirtumą lemia tūris.

Sudėtį lemia tai, kuris sluoksnis patenka į PRP. Laboratoriniame tyrime su trijų donorų krauju buvo lyginamos keturios komercinės sistemos: sistema, renkanti tik plazmą virš ląstelių, pasiekė 1,5 karto didesnę koncentraciją ir beveik visiškai pašalino leukocitus. Sistemos, renkančios buffy coat, pasiekė 3-6 kartus didesnę koncentraciją, o leukocitų buvo 3-6 kartus daugiau.[6] DEPA vertinime, apėmusiame 20 preparatų, išeiga buvo nuo 13,1 iki 79,3 %, nė vienas nepasiekė daugiau nei 90 %.[5]

Tyrimų vertės priklauso tirtai sistemai. Skaičiai gauti laboratoriniuose tyrimuose su kitomis sistemomis ir protokolais. Vi PRP-PRO gamintojas nurodo PRP kiekį, bet nenurodo nei koncentracijos koeficiento, nei ląstelių skaičiaus. Todėl tyrimų verčių ir formulės netaikykite konkrečiam mėgintuvėliui. Jūsų eigos išeigą parodo tik ląstelių skaičiavimas.

Vienas ir du ciklai: apžvalga

Mėgintuvėlis su geliu, vienas ciklas Atviras būdas, du ciklai
Principas Gelis, kurio tankis yra tarp plazmos ir ląstelių tankio, sudaro barjerą 1 ciklas atskiria eritrocitus, 2 ciklas nusodina trombocitus
Centrifugavimas Vi PRP-PRO: 1 200 × g, 7 minutės pagal protokolą, pavyzdžiui, 100 × g ir 400 × g po 10 minučių
Atviri etapai vienas: PRP paėmimas trys: perpylimas, PPP pašalinimas, paėmimas
PRP tūris Vi PRP-PRO: apie 4-4,5 ml iš vieno mėgintuvėlio mažas, pavyzdžiui, nuosėdos 2-4 ml plazmos
Koncentracijos koeficientas plazma toliau nekoncentruojama; Vi PRP-PRO gamintojas duomenų nepateikia dėl mažesnio tūrio gali būti didesnis, laboratoriniame tyrime apie 5 kartus
Leukocitai Vi PRP-PRO gamintojas duomenų nepateikia priklauso nuo to, kiek buffy coat perpilama
Nustato mėgintuvėlis ir naudojimo instrukcija Jūsų protokolas ir Jūsų darbo instrukcija

Vi PRP-PRO: duomenys iš gamintojo gaminio dokumentų, privaloma yra naudojimo instrukcija. Du ciklai: pavyzdžiai iš literatūros, ne rekomendacija.

Kuris būdas kuriai klinikai?

Daugiau ciklų savaime nereiškia geresnio preparato, tik kitokį. Lemia tai, kokia eiga tinka Jūsų protokolui ir Jūsų komandai.

Vi PRP-PRO

Norite eigos, kurią visi komandos nariai atlieka vienodai.

Vienas mėgintuvėlis, vienas ciklas, matoma riba, vienas atviras etapas. Protokolą ir priedus nustato gamintojas, Jūs nieko nedozuojate patys. Nuolatiniam poreikiui skirta klinikos pakuotė su 40 mėgintuvėlių.

PRP Starter Set

PRP ruošimą diegiate iš naujo.

PRP Starter Set rinkinys sujungia Hettich EBA 200 MD, IIa klasės medicinos priemonę, su 20 Vi PRP-PRO mėgintuvėlių ir kraujo ėmimo priemonėmis. Jei jau turite tinkamą centrifugą, PRP Professional Set rinkinyje yra mėgintuvėliai ir vartojimo medžiagos be prietaiso.

Du ciklai

Jūsų protokolui reikia mažo tūrio ir didelio koncentracijos koeficiento.

Tada Jums reikia dviejų ciklų su mėgintuvėliais ir parametrais, kuriuos nustato Jūsų protokolas. Hettich EBA 200 MD leidžia tiesiogiai nustatyti RCF arba apsukas, nuo 200 iki 6 000 aps./min. Numatykite laiko perpylimui ir resuspendavimui.

Matuoti

Norite žinoti, ką duoda Jūsų būdas.

Pasirūpinkite, kad būtų suskaičiuoti trombocitai, leukocitai ir eritrocitai kraujyje ir PRP, ir užsirašykite abu tūrius. Iš jų apskaičiuosite išeigą, koncentracijos koeficientą ir dozę.[5] Pakartokite tai su keliais paruošimais, nes PRP skiriasi tarp asmenų. Daugiau apie tai straipsnyje Vi PRP-PRO ar Density: kuris mėgintuvėlis tinka Jūsų protokolui?

Trys palyginimo klaidos

  1. Lyginti koncentracijos koeficientus neatsižvelgiant į tūrį

    7 kartus koncentruotame PRP 1 ml tūryje ir 1,6 karto koncentruotame PRP 5 ml tūryje gali būti beveik tiek pat trombocitų. DEPA klasifikacija apima ir dozę, t. y. koncentraciją, padaugintą iš tūrio.[5] Užsirašykite abu dydžius, taip pat pradinę vertę kraujyje.

  2. Maišyti skirtingų būdų protokolus

    Mėgintuvėlis ir protokolas neatsiejami. Vi PRP-PRO gaminio dokumentuose aprašytas lygiai vienas ciklas, 1 200 × g 7 minutes. Ir atvirkščiai, mėgintuvėlio su geliu protokolo negalima be patikros perkelti mėgintuvėliams be gelio.

  3. Perimti apsukas, o ne jėgas

    Literatūroje pateikiamuose protokoluose kartais nurodomos tik apsukos per minutę, pavyzdžiui, 1 500 aps./min 5 minutes.[1] Be rotoriaus spindulio iš jų negalima apskaičiuoti jėgos. Kaip perskaičiuoti, parodyta straipsnyje Protokolo perkėlimas į kitą centrifugą: spindulys, RCF, laikas.

Dažni klausimai

Ar dviejų ciklų PRP yra geresnės kokybės?

Skiriasi sudėtis: dažniausiai mažesnis tūris, didesnė trombocitų koncentracija, o leukocitų kiekis priklauso nuo perpylimo. Kokia sudėtis kokiam tikslui tinka, yra profesinis sprendimas. Šiame straipsnyje lyginamas tik ruošimas ir laboratoriniai rodikliai.

Ar Vi PRP-PRO galima centrifuguoti antrą kartą?

Gaminio dokumentuose aprašytas vienas ciklas ir po jo paėmimas, antrasis ciklas neaprašytas. Lemiama yra naudojimo instrukcija, kurią gausite per mūsų kontaktų puslapį.

Ar dviem ciklams reikia antros centrifugos?

Ne. Ciklai atliekami vienas po kito. Centrifuga turi patikimai pasiekti abi jėgas, būti patvirtinta naudoti su šiais mėgintuvėliais, o jos numatytoji paskirtis turi apimti kraujo ruošimą naudoti pacientui. Daugiau apie tai straipsnyje Centrifuga PRP ruošti: reikalavimai.

Ar vieno ciklo PRP yra leukocitų?

Tai priklauso nuo to, kuris sluoksnis patenka į PRP: laboratoriniuose tyrimuose plazma pagrįstos sistemos davė mažai leukocitų, buffy coat sistemos daug.[4][6] Vi PRP-PRO gamintojas ląstelių skaičiaus nenurodo.

Produktai

Šaltiniai

  1. Dhurat R, Sukesh MS. Principles and methods of preparation of platelet-rich plasma: a review and author’s perspective. J Cutan Aesthet Surg. 2014;7(4):189-197. doi:10.4103/0974-2077.150734
  2. Bowen RAR, Remaley AT. Interferences from blood collection tube components on clinical chemistry assays. Biochem Med (Zagreb). 2014;24(1):31-44. doi:10.11613/BM.2014.006
  3. Perez AGM, Lana JF, Rodrigues AA, et al. Relevant aspects of centrifugation step in the preparation of platelet-rich plasma. ISRN Hematol. 2014;2014:176060. doi:10.1155/2014/176060
  4. Oudelaar BW, Peerbooms JC, Huis in ’t Veld R, Vochteloo AJH. Concentrations of blood components in commercial platelet-rich plasma separation systems: a review of the literature. Am J Sports Med. 2019;47(2):479-487. doi:10.1177/0363546517746112
  5. Magalon J, Chateau AL, Bertrand B, et al. DEPA classification: a proposal for standardising PRP use and a retrospective application of available devices. BMJ Open Sport Exerc Med. 2016;2(1):e000060. doi:10.1136/bmjsem-2015-000060
  6. Fitzpatrick J, Bulsara MK, McCrory PR, Richardson MD, Zheng MH. Analysis of platelet-rich plasma extraction: variations in platelet and blood components between 4 common commercial kits. Orthop J Sports Med. 2017;5(1):2325967116675272. doi:10.1177/2325967116675272

Gaminių duomenys: Vi PRP-PRO gaminio dokumentai (D-BIOTECH S.R.L.S., Catania) ir Andreas Hettich GmbH (Tuttlingen) dokumentai.

Pastaba profesionaliems naudotojams: šiame straipsnyje apžvelgiami PRP ruošimo būdai ir laboratoriniai rodikliai remiantis moksline literatūra ir gamintojų duomenimis. Jis nepakeičia nei naudojimo instrukcijos ir ženklinimo, nei profesionalaus kiekvieno atvejo vertinimo.

Skirta tik medicinos specialistams.

Grįžti į tinklaraštį